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重點推介:Meridian可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR/RT-qPCR預(yù)混液(MDX150/MDX151)

 更新時間:2023-11-14 點擊量:788

        邁迪安推出的Air-Dryable™ 可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR/RT- qPCR預(yù)混液是專門為直接從高濃度尿液中快速靈敏地擴(kuò)增DNA/RNA設(shè)計的抗抑性配方,其高靈敏度甚至可以檢測出通常需要驗血才能檢測到的蟲媒病毒,如基孔肯雅病毒。在使用時只需要將引物和探針添加到可風(fēng)干預(yù)混液中,再分裝到反應(yīng)容器中(例如:PCR管)進(jìn)行干燥即可。檢測時,只需要將患者尿液樣本直接加入干燥后的預(yù)混液中,無需核酸提取即可進(jìn)行檢測。

Air-Dryable™ 可風(fēng)干尿液直擴(kuò) qPCR /RT-qPCR 預(yù)混液是不含甘油、含有優(yōu)化的風(fēng)干賦形劑、可兼容風(fēng)干的核酸檢測試劑,是專門針對尿液樣本直接擴(kuò)增設(shè)計的配方,可通過風(fēng)干建立常溫穩(wěn)定型qPCR/RT-qPCR檢,適用于從尿液樣本免核酸提取的DNA 和RNA直接擴(kuò)增。可直接檢測尿液樣本中低濃度細(xì)菌和無細(xì)胞核酸,適用于單重或多重檢測,還可兼容不同風(fēng)干條件。

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分別使用風(fēng)干后的可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR預(yù)混液(紅色)、KAPA Probe ForceRoche, 綠色)和Ultraplex™(QuantBio,灰色)對25%人體尿液樣本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和B族鏈球菌(GBS)靶標(biāo)進(jìn)行三重擴(kuò)增。 結(jié)果顯示,與對比試劑相比,干燥后的可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR預(yù)混液對25%人體尿液樣本具有更高效的多重擴(kuò)增和靈敏度。

更快速獲得測試結(jié)果

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A)分別使用標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增循環(huán)和快速擴(kuò)增循環(huán)對25%人體尿液樣本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和B族鏈球菌(GBS)靶標(biāo)進(jìn)行三重擴(kuò)增。標(biāo)準(zhǔn)循環(huán):95°C5分鐘,95°C10秒,60°C30秒,40個循環(huán);快速循環(huán):95°C3分鐘,95°C1秒,60°C1秒,40個循環(huán)。

B)分別使用標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增循環(huán)和快速擴(kuò)增循環(huán)對5%人體尿液樣本中的3個哺乳動物RNA靶標(biāo)進(jìn)行三重擴(kuò)增。標(biāo)準(zhǔn)循環(huán):逆轉(zhuǎn)錄10分鐘,95°C10秒,60°C10秒,40個循環(huán);快速循環(huán):逆轉(zhuǎn)錄5分鐘,95°C1秒,@60°C1秒,40個循環(huán)。所有反應(yīng)在Quantstudio7FlexReal-TimePCR儀上進(jìn)行。結(jié)果顯示,可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR/RT-qPCR預(yù)混液可在最快速反應(yīng)條件中給出快速優(yōu)異的擴(kuò)增結(jié)果,并且靈敏度和重現(xiàn)性均不受影響。

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將可風(fēng)干尿液直擴(kuò)qPCR/RT-qPCR預(yù)混液干燥后進(jìn)行加速熱穩(wěn)定性實驗。試劑干燥后(紅色)37C 保存1個月,與新鮮液體試劑(黑色)對比,樣本為30%人體尿液。結(jié)果表明,經(jīng)過加速穩(wěn)定性測試,風(fēng)干混合物在環(huán)境溫度下保持了充分的活性,預(yù)計穩(wěn)定性大于12個月。

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